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    HE染色实验时需要注意什么?

    发布时间: 2021-03-29  点击次数: 39次
       HE染色实验简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中zui基本、使用zui广泛的技术方法。
      HE染色实验步骤:一般包含取材固定,脱水透明,浸蜡包埋,切片与贴片,脱蜡染色,脱水透明,封固等步骤。
      HE染色实验时的注意事项:
      1、染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。
      2、切片染苏木精后,分色这一步是关键,应在显微镜下控制进行,一般以细胞核染色清楚(晰)而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅,应重新染色后再行分色。
      3、切片经酒精脱水后,入二甲苯时可出现白色不透明状态,此为脱水不彻底,应将切片退回无水酒精,更换酒精、二甲苯,以求彻底脱水与透明。
      4、在染色过程中不要让切片干燥,以免切片收缩、变形,影响神经元形态。
      5、切片从二甲苯取出或进入二甲苯前,切片周边均应擦干净或吸干多余水分。
      6、zui后封固时,要用中性树脂,防止日后褪色,盖片要选大于组织块的面积,如漏出一部分不久将会褪色,所用树脂浓度要适当,树脂封固时不能有气泡。
     
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