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荧光素酶检测

荧光素酶检测

简要描述:
荧光素酶检测技术:通过miRNA靶标的鉴定,从而进行miRNA功能的深入研究。

更新时间:2020-12-03

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厂商性质:其他

荧光素酶检测实验原理

miRNA通过碱基配对结合到靶mRNA的3'UTR区,抑制靶基因的翻译或对靶基因mRNA的降解达到调控基因表达的目的。将靶mRNA的3'UTR区构建至萤火虫荧光素酶报告基因的3'端,与miRNA表达载体及海肾荧光素酶报告基因载体并转染细胞,先后加入两种底物荧光素,通过对荧光素酶报告基因的表达检测确认miRNA对靶基因的调控效果。

荧光素酶检测技术应用:通过miRNA靶标的鉴定,从而进行miRNA功能的深入研究。

 实验问题 原因 推荐解决方法
 发光检测值过低
 
 荧光素酶表达过低 注意调整细胞状态、转染条件、转染量,提高发光值
 检测试剂 避免反复冻融以及保存时间过长
 发光检测值过高 荧光素酶表达过高 建议通过降低转染量或减少检测体积等降低发光
 

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