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甲基化检测(BSP)

甲基化检测(BSP)

简要描述:
甲基化检测 BSP:用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,则未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变。随后设计BSP引物进行PCR,在扩增过程中尿嘧啶全部转化为胸腺嘧啶,然后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化称为BSP-直接测序方法。

更新时间:2020-12-03

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厂商性质:其他

甲基化检测BSP/MSP法
DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一,它可以抑制基困的表达。甲基化通常发生在胞嘧啶的C5位,形成5-甲基胞嘧啶(5mC),甲基化的胞密啶多位于CpG岛上。DNA甲基化在人的正常发育、X染色体失活、衰老以及许多人类疾病(如发育畸形、癌症、心血管疾病、糖尿病和神经心理失调等)过程中发挥重要作用,已经成为表观遗传学和表观基因组学的重要研究内容。该方法为甲基化检测的金标准,可定量检测基因甲基化水平。基因组DNA经亚硫酸氢盐处理后,设计BSP引物扩增目的片段,然后对PCR产物进行克隆并选取10个转化子序列,即可确定所研究的CpG区域的甲基化频率。目前,基因的甲基化研究主要结合亚硫酸氢钠处理和PCR技术,分为甲基化特异性PCR和硫化测序PCR。

甲基化检测BSP:甲基化的胞嘧啶在亚硫酸氢钠发生脱氨基后不会转变,用一对持异性引物扩增后测序,再与DNA原始序列比对确定甲基化位点。测序法克服了只能针对单个位点检测,并且这些位点必须是限制性内切酶识别位点的缺点,可以对任何基因序列的甲基化状态进行检测。

实验服务:包含DNA抽提,引物设计合成,亚硫酸盐处理,反应。每个反应可以检测50bp左右,可以目的区域。

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